论著
4色与8色荧光抗体组合检测多发性骨髓瘤患者微小残留病的比较分析
中华血液学杂志, 2017,38(4) : 272-278. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2017.04.003
摘要
目的

探讨与比较4色和8色荧光抗体组合检测多发性骨髓瘤(MM)患者治疗后微小残留病(MRD)的灵敏度。

方法

建立一组以CD38/CD138对浆细胞进行设门,同时检测胞膜抗原CD45、CD19、CD56、CD117及胞质轻链cKappa、cLambda的8色抗体组合;6组4色抗体组合中,4组以CD38/CD138设门,分别分析CD45/CD19、CD56/CD117、CD19/CD56胞膜抗原(M1-3)和胞质轻链(C组)表达;MC1-2组分别以CD38/SSC和CD138/SSC设门,同时检测CD19或CD45胞膜抗原和胞质轻链。采用以上组合对20名健康志愿者和73例完全缓解后MM患者标本进行检测并进行比较分析。

结果

8色组合识别异常浆细胞(aPCs)和克隆性浆细胞(cPCs)的阳性率均为82.19%,一致率为89.04%(65/73);cPCs中位比例为0.105%,均显示明显的单克隆轻链;敏感度为0.004%。CD38/SSC设门的浆细胞比例明显高于CD38/CD138(P<0.001)和CD138/SSC(P=0.001)设门。4色组合中C-胞质组MRD阳性率最低,仅为65.75%,明显低于8色组合的82.19%(P=0.024);M2-56/117组检测的aPCs比例最低,为0.095%,与其他组相比差异有统计学意义(P=0.014);MC1-CD38和MC2-CD138组,以cPCs作为判断标准时MRD阳性率均高于以aPCs为判断标准(P<0.05),结果一致率分别为68.49%(50/73)和79.45%(58/73)。与8色组合相比,4色组合中MC2-CD138组敏感性、准确性和阴性预测值最高,阳性预测值和特异性也较高;其次是M1-45/19组。

结论

CD38/CD138设门更准确,反映克隆性的胞质轻链检测较胞膜抗原更敏感,胞膜抗原异常表达并不完全代表为cPCs,建议胞膜抗原和胞质轻链同时检测。有条件者建议选用8色组合,4色组合中建议同时采用M1-45/19和MC2-CD138组合。

引用本文: 王亚哲, 路瑾, 郝乐, 等.  4色与8色荧光抗体组合检测多发性骨髓瘤患者微小残留病的比较分析 [J]. 中华血液学杂志,2017,38( 4 ): 272-278. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2017.04.003
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多参数流式细胞术(multiparameter flow cytometry,MFC)可识别浆细胞异常抗原的表达并精确判断克隆性,常用于多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者微小残留病(minimal residual disease,MRD)的检测,以评价治疗的有效性并预测预后[1,2,3,4,5]。我们在前期工作中发现,初诊MM患者高表达CD38和CD138,异常表达CD45、CD19、CD56和CD117胞膜抗原,限制性表达胞质轻链cKappa(cκ)或cLambda(cλ),与国外报道相似[2,6]。根据上述抗原表达特点我们建立了一组8色抗体组合。但目前国内只有少数医院可进行8~10色检测[7,8],多数仍以4色为主,缺乏统一及标准化。受荧光参数限制,如何较好地利用4色仪器检测MM患者MRD,为临床诊治提供准确结果?本文我们设计了6组4色抗体组合,分别比较了采用CD38/CD138、CD38/SSC和CD138/SSC设门分别或同时检测胞膜抗原及胞质轻链的敏感性和特异性,与8色组合检测结果进行对比分析,旨在筛选适用范围更广、准确性及敏感性更高的抗体组合。

 
 
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微小残留病
多发性骨髓瘤