论著
重型再生障碍性贫血模型小鼠骨髓间充质干细胞过度衰老的机制研究
中华血液学杂志, 2017,38(4) : 325-329. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2017.04.012
摘要
目的

探讨重型再生障碍性贫血(SAA)模型小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSC)过度衰老的机制。

方法

选择BALB/c小鼠40只,随机分为正常组20只、SAA组20只。应用白消安灌胃联合IFN-γ腹腔注射诱导建立SAA小鼠模型;分离培养两组小鼠的BM-MSC。观察BM-MSC细胞形态和细胞骨架;CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖与细胞周期情况;比较衰老相关β-半乳糖苷酶(Senescence-associated β-Galactosidase, SA-β-gal)的染色阳性细胞比例;Western blot法检测mTOR蛋白的表达水平。

结果

正常组小鼠的BM-MSC细胞呈纺锤状、边界清晰,应力纤维平行排列、整齐;而SAA小鼠的BM-MSC细胞体积增大,呈平铺、边界不清状,应力纤维紊乱模糊。CCK-8结果显示,SAA小鼠的BM-MSC的增殖速率较正常组缓慢,在第2天开始差异有统计学意义(P<0.05)。SAA组小鼠BM-MSC的G0/G1期细胞比率[(77.461±1.567)%对(46.045±2.055)%,t=-34.384,P<0.001]、SA-β-gal阳性细胞比例[(75±11)%对(28±8)%,t=15.454,P<0.001]较正常组升高;SAA小鼠BM-MSC的mTOR表达水平高于正常小鼠。

结论

SAA小鼠模型中BM-MSC是衰老的MSC,且mTOR通路激活可能是导致其衰老发生的机制。

引用本文: 欧议清, 刘海燕, 陆伟, 等.  重型再生障碍性贫血模型小鼠骨髓间充质干细胞过度衰老的机制研究 [J]. 中华血液学杂志,2017,38( 4 ): 325-329. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2017.04.012
正文
作者信息
基金 0  关键词  0
English Abstract
评论
阅读 0  评论  0
相关资源
论文 | 视频

版权归中华医学会所有。

未经授权,不得转载、摘编本刊文章,不得使用本刊的版式设计。

除非特别声明,本刊刊出的所有文章不代表中华医学会和本刊编委会的观点。

再生障碍性贫血(AA)是一种骨髓造血衰竭综合征,其发病机制尚未完全明确,尽管近十年的研究更强调免疫异常的主导作用,普遍认为AA是一种由活化的T淋巴细胞及其分泌的淋巴因子导致的造血干细胞过度凋亡[1]。但造血微环境,尤其骨髓间充质干细胞(BM-MSC)的异常仍应引起重视。BM-MSC是骨髓造血微环境的重要组分,其分化产生的成骨细胞、成软骨细胞等基质细胞也是构成骨髓微环境的组分,并且能分泌IL-6、IL-11、IL-12等多种细胞因子共同维持造血微环境的稳定[2,3]。既往研究证实AA患者BM-MSC体外培养的增殖能力以及支持造血的能力显著低于健康对照者[4]。细胞增殖能力的下降以及生理功能的减退是细胞衰老的特征之一,BM-MSC是否由于衰老而影响了骨髓微环境正常的支持造血的功能?已知细胞衰老后通常表现出衰老相关β-半乳糖苷酶(Senescence-associated β-galactosidase, SA-β-gal)活性的增加[5]。而mTOR信号通路通过降低多潜能基因Nang和Oct-4的表达等方式参与了多种细胞的衰老过程[6]。为此,我们比较了正常小鼠与重型AA(SAA)模型小鼠BM-MSC细胞的形态、骨架、增殖、SA-β-gal活性及mTOR蛋白表达等情况,验证SAA小鼠BM-MSC是否衰老,并探寻AA发病中骨髓造血微环境缺陷的可能机制。

 
 
展开/关闭提纲
查看图表详情
回到顶部
放大字体
缩小字体
标签
关键词
贫血,再生障碍性
间质干细胞
衰老